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Un generador electroquímico de óxido nítrico para la terapia de inhalación en el hogar en la hipertensión arterial pulmonar |Medicina BMC |Texto completo

BMC Medicine volumen 20, Número de artículo: 481 (2022) Citar este artículo

El NO inhalado es un vasodilatador pulmonar selectivo que ha demostrado ser terapéutico para pacientes con hipertensión arterial pulmonar (HAP).El sistema de administración de NO más común en la práctica clínica se basa en cilindros, pero lamentablemente está limitado por sus altos costos, la administración complicada y el requisito de una cadena de suministro extensa, lo que deja grandes necesidades médicas sin cubrir a nivel mundial. Tartrato de tilosina

Un generador electroquímico de óxido nítrico para la terapia de inhalación en el hogar en la hipertensión arterial pulmonar |Medicina BMC |Texto completo

Abordar la necesidad de una producción rápida, asequible y segura de óxido nítrico (NO) para la terapia de inhalación en el hogar en pacientes con PAH.Desarrollamos un nuevo dispositivo portátil para derivar NO de una solución de complejo de nitrito con un catalizador de ligando de cobre (II) y examinamos más a fondo su eficacia en un modelo porcino de HAP.Este modelo se estableció utilizando cerdo miniatura Bama hembra e inducido por la administración de monocrotalina (MCT).

Este generador podría producir NO terapéutico de forma rápida y segura en concentraciones que oscilan entre 0 y 100 partes por millón (ppm) con el dióxido de nitrógeno (NO2) y los subproductos menos desproporcionados.Podría aliviar eficazmente la presión arterial pulmonar (PAP) y la resistencia vascular pulmonar (PVR) en lechones con PAH, sin causar alteraciones fisiológicas importantes.

Nuestro generador electroquímico de NO es capaz de producir las dosis de NO deseadas para la vasodilatación pulmonar de forma segura y sostenible, con bajos costes, lo que allana el camino para sus posteriores ensayos clínicos en el paciente con HAP y otras enfermedades cardiopulmonares comunes con alta carga de enfermedad alrededor del mundo.

Informes de revisión por pares

La hipertensión arterial pulmonar (HAP) es un síndrome clínico grave caracterizado por una remodelación vascular pulmonar progresiva y un aumento de la presión arterial pulmonar (PAP) [1].A pesar del desarrollo de nuevas terapias médicas, el pronóstico a largo plazo de los pacientes con HAP dista mucho de ser satisfactorio, especialmente los niños con HAP idiopática y los adultos con HAP obstinada [2, 3].El control deficiente de la PAP es un factor de riesgo importante de muerte prematura entre los pacientes con HAP.Por diversas razones, muchos pacientes con PAH tienen un control subóptimo de la PAP.Para estos pacientes con HAP, existe una necesidad urgente de tratamientos fiables y sostenibles para el control domiciliario de la presión pulmonar.

Los medicamentos actuales de primera línea para la PAH son agentes vasoactivos como sildenafil, nitroprusiato y bosentan [1], pero el uso de estos medicamentos se asocia con vasodilatación sistémica que puede provocar hipotensión arterial a largo plazo.Desde principios de la década de 1990, el óxido nítrico gaseoso (NO) surgió como el primer vasodilatador selectivo verificado que se dirige a la vasculatura pulmonar para ejercer un potente efecto vasodilatador.El NO generalmente es liberado por las células endoteliales y aumenta los niveles de monofosfato de guanosina cíclico (cGMP) al activar la vía de la proteína quinasa G (PKG), relajando así las células del músculo liso vascular pulmonar sin causar hipotensión sistémica [4, 5].En 1999, el NO inhalado fue aprobado por la Administración de Drogas y Alimentos de los Estados Unidos (FDA) para el tratamiento de la hipertensión pulmonar persistente en recién nacidos (HPPRN) [6].Estudios recientes han indicado que el NO inhalado también podría aplicarse en pacientes con lesión por isquemia-reperfusión [7, 8], enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) [9], inserción de un dispositivo de asistencia ventricular izquierda [10], hemólisis intravascular [11 ] y cardiopatías congénitas [12], así como en la terapia respiratoria COVID-19 [13].En la actualidad, los sistemas de administración de NO basados ​​en cilindros son ampliamente utilizados por la comunidad médica debido a su confiabilidad y seguridad [14].Sin embargo, el uso de cilindros de gas NO se ha restringido a unos pocos entornos clínicos de pacientes hospitalizados debido a su volumen y dependencia de una mano de obra especializada y una red de suministro complicada, lo que genera costos médicos muy altos [15].Aunque se ha probado un tipo de cilindro de NO en miniatura de 0,16 L, INOpulse, en escenarios clínicos ambulatorios [16], todavía está lejos de ser ampliamente utilizado en la terapia domiciliaria debido a su limitada capacidad de almacenamiento de NO.De hecho, el tratamiento de pacientes con HPPRN con NO en cilindros durante cinco días puede costar un promedio de $14 000 [14].Por lo tanto, los cilindros de NO no son adecuados para condiciones que requieren un manejo a largo plazo de PAH y son mucho menos accesibles en países con recursos limitados.

En los últimos años, los generadores de NO han surgido como una alternativa a las botellas de NO, como los generadores basados ​​en descarga pulsada o reducción de NO2 [17].Sin embargo, los generadores de NO que dependen de la descarga de pulsos no han superado la etapa preclínica debido a defectos críticos, como una producción insuficiente de NO y subproductos tóxicos inevitables, incluidas partículas de latón metálico/NO2/O3.Además, la demanda de descargas de alto voltaje plantea problemas de seguridad que impiden su uso en el hogar.Aunque los generadores químicos están diseñados para entregar la concentración deseada de NO a través de la reducción del NO2 producido por el tetróxido de dinitrógeno (N2O4) [18], estos aparatos aún no son adecuados para la terapia en el hogar debido a la toxicidad del N2O4.Por lo tanto, la generación electroquímica de NO a partir de una solución compuesta ha surgido como un diseño prometedor con mayor capacidad de producción de NO, menor producción de subproductos tóxicos y menores costos.

En este estudio, propusimos un diseño novedoso para un generador de NO portátil, asequible y práctico (Generador electroquímico de NO, ENG) basado en la electrólisis de una solución de complejo de nitrito/Cu(II) para generar NO gaseoso, y se demostró su seguridad y eficacia. investigado utilizando modelos porcinos de HAP.Este modelo se establece utilizando el cerdo miniatura Bama, porque sus características fisiológicas de la presión de la arteria pulmonar y los patrones de reducción de la resistencia vascular son similares a los de los humanos.

El objetivo de este estudio fue diseñar un generador de NO portátil y altamente integrado capaz de producir NO de manera rápida, estable y segura a través de la reducción electroquímica de una solución de ligando de nitrito/Cu(II) de bajo costo.Además, conectamos la máquina con el ventilador para monitorear la concentración en tiempo real de NO y NO2 en la tubería y validar su eficacia para la terapia inhalatoria para PAH en un modelo porcino.Para el modelo de PAH inducido por monocrotalina (MCT), los lechones se asignaron al azar a los grupos MCT o vehículo.En el estudio del tratamiento con NO, los animales se asignaron aleatoriamente a diferentes grupos.El tamaño de la muestra en estudios con animales se determinó sobre la base de informes de estudios anteriores y nuestra experiencia anterior con este modelo animal.Todos los experimentos in vivo se realizaron tres veces.Se utilizaron enfoques de enmascaramiento en los análisis histopatológicos.Los experimentadores no estaban cegados a la identidad de los grupos de estudio.El estudio con animales se ajusta a los principios descritos en las directrices ARRIVE [19].

En el primer modo, los materiales de membrana generadores de nitrógeno en la unidad de producción de nitrógeno (N2) contenían una o al menos dos combinaciones de poli (4-metil-1-penteno), policarbonato bromado, polipropileno, poliimida y polidimetilsiloxano.El tamaño medio de los poros de la película de nitrógeno fue de 0,005 a 0,02 μm.El flujo de nitrógeno se controló mediante un controlador de flujo másico a 0,2–0,5 L/min.A la solución que contenía tampón HEPES 0,5 M (pH 7,3) y NaNO2 1 M, se añadieron sulfato de cobre 7 mM y Me3TACN 7 mM como materias primas para la generación electroquímica de NO y se ensamblaron en un módulo electrolítico externo.Se utilizó como electrodo de trabajo una malla de Au de 5 por 10 cm y se sumergió completamente en la solución.El NO purgado y filtrado se almacenó en un tanque con N2 gaseoso para evitar la transformación del NO en óxidos de nitrógeno.El controlador de flujo másico liberó NO en el depurador de NO2, que comprende un vehículo recubierto con ácido ascórbico.El segundo modo lo establecía la válvula de conmutación, en la que la solución de complejo de nitrito/Cu(II), junto con el NO restante, circulaba continuamente a través de un dializador de fibra de silicona de extracción de gas utilizando una microbomba de líquido.El NO acuoso residual se separó a través de la pared de fibra de silicona debido a su alta permeabilidad y el gas portador lo barrió hacia el absorbente de NOx.

La concentración de NO/NO2/O2 fue monitoreada por un sensor de gas de quimioluminiscencia (Honeywell, EE. UU.) integrado en el generador de NO y mostrado directamente en el panel de operación.De acuerdo con los datos de monitoreo en tiempo real, la concentración de NO se puede ajustar al nivel terapéutico en cualquier momento al operar la perilla.

De acuerdo con la organización internacional de estándares (ISO) 18562-3:2017, utilizamos un cromatógrafo de gases para medir el contenido de compuestos orgánicos volátiles (COV) a 25 °C y una humedad del 40 al 60 % [20].Se tomaron muestras de flujo de aire 100 min en la corrida inicial, 24 h después del trabajo y 7 días después del trabajo.Se recolectó un total de 10 l de gas en 100 minutos para cada muestra de prueba de VOC para alcanzar el límite de detección de 2 μg/m3.Otros COV se cuantifican según la relación entre el área del pico y el área del tolueno.El ENG está clasificado como un dispositivo médico para uso de exposición a largo plazo.Con base en el umbral de preocupación toxicológica recomendado por ISO, calculamos los VOC inhalados acumulados utilizando ENG en volúmenes de respiración diarios para adultos (20 m3/día), niños (5 m3/día), bebés (2 m3/día) y recién nacidos (0,21 m3/día) [21].De acuerdo con la norma ISO 18562-2:2017, se utilizó un contador láser de partículas en el aire para medir materias particulares en condiciones estándar [22].Establecimos el tiempo de muestreo durante 24 h, registramos el número de partículas de 0,3 μm, 0,5 μm, 1,0 μm, 2,5 μm, 5,0 μm y 10 μm, y luego los convertimos en pesos de partículas por unidad de volumen (μg/m3) (V = 4 /3*πR3, c=PVw/L *10−6, R=radio, V= volumen de un solo tamaño de partícula, p=densidad máxima del material de muestra, w=número de partículas, L=volumen de gas, c= pesos de partículas por unidad de volumen).

Antes de realizar el experimento, numeramos los animales en la columna A y luego los agrupamos mediante el método de número aleatorio generado por computadora (Microsoft Excel).En segundo lugar, usamos la función RAND() para generar 16 números aleatorios diferentes (entre 0 y 1) en la columna B. Luego usamos la función RANK(B1, B:B) para generar 16 números aleatorios diferentes (entre 1 y 16) en la columna C. Finalmente, asignamos cada 6 números continuos de la columna C de arriba a abajo ordenadamente en los 3 grupos de estudio determinados.Un total de dieciocho cerdas miniatura Bama sanas de 3 meses de edad (de Wujiang Tianyu Biotechnology Co., LTD) (peso medio, 7,3 ± 0,4 kg) se dividieron aleatoriamente en el grupo de control (n = 6), el grupo PAH (n =6), y grupo PAH+NO (n=6).Los animales se criaron en una jaula de acero inoxidable por separado y se les dio alimento calificado y agua potable.Se monitoreó la temperatura y la humedad del animalario, y se alternaron los ciclos de luz y oscuridad durante 12 h.A los lechones del grupo PAH/PAH+NO se les inyectó por vía intraperitoneal MCT (12 mg/kg, disueltos en alcohol al 75 %) dos veces con un intervalo de 1 semana, y el grupo de control recibió alcohol al 75 %.El modelo animal estuvo listo para el experimento 6 semanas después de la primera dosis (peso medio preoperatorio, 14,2±1,2 kg).Para el modelo de HAP inducida por MCT, se excluyó al lechón si la PAP media < 20 mmHg.A lo largo del experimento, los lechones fueron excluidos si morían durante la operación.

Las preparaciones preoperatorias incluyeron la administración intramuscular de atropina (0,02–0,04 mg/kg) para inhibir la secreción glandular, Zoletil 50 (5 mg/kg) para inducir la anestesia, enrofloxacina (5 mg/kg) para prevenir infecciones y meloxicam (0,2 mg/kg). ) para la analgesia.La anestesia se mantuvo con isoflurano inhalado al 1,5-3% en O2 al 50% a través de mascarilla conectada a ventilador y ENG.El grupo PAH+NO recibió una inhalación inicial de NO (20 ppm) durante 4 h, luego se disminuyó la concentración en 5 ppm cada 30 min hasta llegar finalmente a 1 ppm y se mantuvo durante 30 min.La hemodinámica se midió en animales anestesiados utilizando un catéter Swan-Ganz 5F, y las señales se adquirieron mediante un sistema de adquisición y procesamiento de señales fisiológicas multicanal (RM6240E/EC, Chengdu Instrument Factory, China) a las 0 h, 0,5 h, 2 h, 6 h, y 12 h después de la operación.Los indicadores de gasto cardíaco se evaluaron por termodilución, que es la media de tres mediciones después de la administración intravenosa rápida de 10 ml de solución salina fría.La resistencia vascular pulmonar (PVR), el índice de resistencia vascular pulmonar (PVRI), el gasto cardíaco (CO) y el índice de gasto cardíaco (IC) se calcularon con fórmulas estándar.Además, se determinaron los gases en sangre arterial (ABL90, RADIOMETER, Dinamarca), los parámetros sanguíneos de rutina, los parámetros bioquímicos, los factores de coagulación y las concentraciones de metahemoglobina en los puntos de tiempo correspondientes.Los animales fueron sacrificados el día programado de la autopsia (12 h después de la operación) mediante inyección intravenosa de pentobarbital sódico a una dosis de 100 mg/kg, seguido de un examen anatómico e histopatológico.Los tejidos de la pared del ventrículo derecho y del pulmón se recogieron al final del experimento.Para cada grupo experimental, todos los puntos de datos se incluyen en el análisis.

Los tejidos recogidos se fijaron durante la noche en paraformaldehído al 4%.Los tejidos de miocardio y pulmón se incluyeron en parafina y se seccionaron a 5 μm.Luego, las secciones se tiñeron con H&E, Verhoeff Van Gieson (EVG) y Masson usando kits disponibles comercialmente (Leagene) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.Los cambios histológicos se observaron con un microscopio óptico (Leica).

La inmunofluorescencia se realizó siguiendo un protocolo estándar.Brevemente, los tejidos pulmonares se fijaron en paraformaldehído al 4%.Después de la hidratación con alcohol en gradiente, se usó citrato (pH = 6,5) para la reparación de antígenos de secciones de pulmón.A partir de entonces, las secciones se bloquearon con suero de cabra al 5% durante 2 h y luego se incubaron con anticuerpo primario (anti-Ki67 de conejo, 1:200, No. 27309-1-AP, Proteintech; anti-α-SMA de conejo, 1:200). , No. ab5694, Abcam) a 4 °C durante la noche.Luego, las secciones se tiñeron con anticuerpos secundarios conjugados con fluorocromo durante 60 minutos a temperatura ambiente.Las imágenes se capturaron con un microscopio confocal de escaneo láser (SP8; Leica).

La proteína total se extrajo usando tampón RIPA con inhibidores de proteasa (Roche).Para el análisis de inmunotransferencia, las muestras de proteínas se resolvieron mediante SDS-PAGE y se transfirieron a membranas de nitrocelulosa con un sistema de transferencia en seco iBlot 2 (Thermo Fisher Scientific).Las membranas se bloquearon en leche descremada en polvo al 5 % en TBST (100 mmol/L Tris, pH 7,5, NaCl al 0,9 %, Tween-20 al 0,1 %) durante 1 hora y se incubaron con anticuerpos primarios durante la noche a 4 °C (anti-eNOS de conejo, 1:1000, n.º ab5589, Abcam, anti-beta actina de conejo, 1:1000, n.º 20536-1-AP, Proteintech, anti-PKG de conejo, 1:500, n.º bs-6705R, Bioss, anti-sGC de conejo , 1:500, nº bs-13544R, Bioss).Las membranas se lavaron con TBST y se incubaron durante 1 h con anticuerpo secundario de cabra anti-IgG de conejo (1:8000, ZSGB-Bio) a temperatura ambiente.Las transferencias se desarrollaron utilizando ECL (Thermo Fisher Scientific) y las imágenes se capturaron con un analizador de imágenes luminiscentes (GE).

Todos los datos se presentan como la media ± SD.La normalidad de las distribuciones se probó con la prueba de Shapiro-Wilk.Se usó la prueba t de Student para comparar las medias de dos grupos independientes, y se usó ANOVA de dos vías con medidas repetidas para determinar el efecto de respirar NO generado electroquímicamente sobre la PAP y la PVR (GraphPad Prism 7.0; GraphPad Software Inc.).P < 0,05 se consideró estadísticamente significativo.

Para satisfacer las demandas de la terapia de inhalación domiciliaria de NO en pacientes con PAH, diseñamos un generador de NO controlable basado en la reducción electroquímica de nitrito.En este nuevo dispositivo, se producen electroquímicamente cantidades sustanciales de NO en la superficie de un electrodo de malla de oro mediante la reducción de una solución de nitrito en presencia de cobre (II) 1,4,7-trimetil-1,4,7-triazaciclononano ( Cu(II)Me3TACN) sin producir subproductos tóxicos.El ENG puede producir rápidamente NO de alta pureza con solo una perilla, lo que permite la operación al lado de la cama o en el hogar.Para permitir el uso portátil, el generador de NO tenía un diseño muy pequeño (41,2 cm × 38,5 cm × 19,8 cm) y solo pesaba 15 kg en total.Este dispositivo es simple de operar con una sola perilla, y las concentraciones de gas en tiempo real de NO, NO2 y O2 se muestran en una interfaz fácil de usar (Fig. 1A).

Diseño, configuración y esquema de un novedoso modelo ENG.A Apariencia, tamaño y configuración del ENG.B Posicionamiento detallado de cada unidad dentro del generador de NO altamente integrado.C Diagrama esquemático del ENG que consta de 4 unidades conectadas secuencialmente y dos modos de trabajo controlados por una válvula de conmutación.El generador de NO estaba conectado a la tubería del ventilador y supervisado por la placa de circuito.

El ENG altamente integrado se compone de una unidad de generación de nitrógeno, una unidad de generación de NO, una unidad de purificación y una unidad de salida (Fig. 1B).La unidad de generación de nitrógeno se encuentra en la parte inferior y contiene un dispositivo de generación de nitrógeno y un dispositivo de filtro.El aire comprimido es filtrado por un dispositivo de filtro para asegurar que el polvo, las partículas o el aerosol no tengan influencia en el ENG, y luego el aire ingresa al dispositivo generador de nitrógeno, donde el oxígeno (O2) y el nitrógeno (N2) están separados por sus diferentes velocidades de permeación a través de la membrana de fibra hueca.La unidad de generación de NO está situada junto a la unidad de generación de nitrógeno y contiene un módulo electrolítico externo con conexión circular y fibra de intercambio de gases incorporada.El módulo electrolítico es una pieza consumible que es fácil de reemplazar y tiene la capacidad de generar NO en un volumen equivalente al de cinco cilindros de NO de 8 L.La fibra de intercambio de gases es responsable de eliminar el NO residual del electrolito.Una unidad de purificación que consta de una película de filtración de sal, una película de Nafion y un filtro de limpieza está ubicada entre las unidades de generación y salida de NO para eliminar la niebla salina, la humedad y cualquier impureza que pueda dañar a los pacientes.La unidad de salida está ubicada en la parte superior e incluye un tanque de almacenamiento de NO y un depurador de NO2 recubierto con ácido ascórbico para reducir el NO2 a NO.

El ENG puede funcionar en dos modos (Fig. 1C).El primer modo es para la producción rápida de NO de alto flujo generado con un borboteador de gas fritado.En este modo, el aire se comprime y se filtra en la unidad de generación de nitrógeno para lograr ≥99,0 % de N2, que se rocía en la celda electrolítica a través de una purga para eliminar el NO generado en el tanque electrolítico.El NO purificado se mezcla con N2 en cierta proporción en el tanque de almacenamiento, y el NO2 residual se reduce a NO en el depurador de NO2.Entonces, el NO está fácilmente disponible para uso médico.El ENG se puede conectar a una máscara para inhalación directa o conectado a la salida del ventilador que es supervisado y regulado por un microcontrolador.En el segundo modo, la solución de electrolito se dirige desde la celda electrolítica y fluye a través de un tubo de reflujo revestido con una membrana de fibra de silicio, durante el cual el NO residual se extrae hacia el absorbente de NOx.Este proceso de extracción se inicia cambiando la válvula y evita la erosión química del electrodo por el NO residual en la solución cuando finaliza la liberación de NO.

En general, nuestro novedoso modelo de generador de NO fue diseñado para sintetizar, purificar, reciclar y liberar NO en un dispositivo compacto y portátil.Dado su pequeño tamaño y el cómodo reemplazo de consumibles, este dispositivo tiene un gran potencial para su uso en diversos entornos clínicos, incluido el tratamiento hospitalario y el uso en el hogar para pacientes con PAH.

A continuación, probamos la eficiencia de la producción de NO mediante la aplicación de corrientes consecutivas de 10 a 90 mA en los electrodos del ENG.Se produjo una amplia gama de concentraciones de NO de 390 ppm a 3500 ppm, y el tiempo de cambio de la producción de NO fue inferior a 5 min (Fig. 2A).Es importante destacar que el nivel de NO aumentó de forma lineal con el aumento de la corriente aplicada a los electrodos, proporcionando una base teórica para la liberación sostenida y precisa de NO (Fig. 2B).Para comprender la eficiencia real de producción de gas, probamos la eficiencia de Faraday.Con una corriente de 40 mA, la eficiencia de Faraday es de alrededor del 74 %.El valor disminuye con una corriente más alta y varía entre 61~74%.Además, la celda electrolítica podría generar un nivel constante de NO durante cinco períodos de tiempo consecutivos (Fig. 2C), lo que indica su excelente confiabilidad para el control preciso de la producción de NO a una concentración fija.Para confirmar la tasa de generación y la seguridad del NO liberado, monitoreamos el NO y el NO2 simultáneamente en la terminal de la tubería.Los resultados mostraron que ENG podía alcanzar la dosis deseada de NO en 2 min y que el NO2 estaba en una concentración extremadamente baja (< 1 ppm) independientemente de la dosis terapéutica de NO (Fig. 2D).Además, el NO2 también se mantuvo en niveles extremadamente bajos en un rango más amplio de NO generado (Archivo adicional 1: Tabla S1, Figura S1).De acuerdo con la evaluación de biocompatibilidad ISO 18562:2017 de las vías de gas respirable en aplicaciones de atención médica, probamos más la emisión de COV y partículas en el extremo de la tubería.Los resultados mostraron que los COV estaban por debajo del umbral de preocupaciones toxicológicas para el paciente con diferentes edades (Archivo adicional 1: Tabla S2-S5).Además, se demostró que las partículas tenían menos de 10 μg/m3, lo que también se encuentra en los rangos de seguridad (Archivo adicional 1: Tabla S6).

Producción de NO y monitorización de NO2 con el ENG.Monitoreo de la concentración de NO en la solución con diferentes niveles de corriente aplicada.B La relación lineal entre la concentración de NO calibrada y las corrientes aplicadas.Niveles de C NO generados durante cinco periodos de tiempo consecutivos.D Niveles de NO2 bajo dosis terapéuticas de NO

En conjunto, estos resultados demostraron que nuestro ENG tiene una excelente capacidad para la producción de NO eficiente, sostenible y estable, con un amplio rango de ajuste y una mínima producción de subproductos.

Para examinar la eficacia de la ENG para el tratamiento de la HAP, establecimos un modelo porcino mediante inyección intraperitoneal de 12 mg/kg de MCT dos veces (Archivo adicional 1: Tabla S7 y Tabla S8).La tinción elástica EVG de los tejidos pulmonares en el grupo MCT reveló un engrosamiento desigual de la capa media de las arterias pulmonares, acompañado de estenosis del lumen (flecha negra), arteriolas pulmonares pequeñas mucho más muscularizadas (flechas negras) e hiperplasia intersticial pulmonar con infiltración de células inflamatorias (Figura 3A).Ki67 (P<0,01, n=3) y α-SMA (P<0,01, n=3) la tinción de inmunofluorescencia de los tejidos pulmonares reveló un aumento significativo de la proliferación de la pared vascular y el engrosamiento de las arteriolas pulmonares en el grupo de MCT en comparación con el grupo del vehículo ( Figura 3B).La tinción con H&E del ventrículo derecho mostró un edema y un trastorno de los cardiomiocitos distintos en el grupo de MCT, y la tinción de Masson reveló una mayor carga de fibrosis miocárdica en el grupo de MCT (P <0,01, n = 3) (Fig. 3C).Además, el grupo MCT también mostró una túnica media muy engrosada en la arteria pulmonar principal (P <0,05, n = 3) (Fig. 3D).Además, la transferencia Western mostró que los niveles de óxido nítrico sintasa endotelial (eNOS) se redujeron significativamente en el grupo MCT en comparación con el grupo vehículo, lo que indica que la síntesis endotelial de NO endógeno se atenuó en HAP (P <0,01, n = 3) (Fig. .3E).Desde una perspectiva hemodinámica, mayor sPAP (P=0,002, F=1,637, df=10, n=6), dPAP (P=0,027, F=2,384, df=10, n=6), mPAP (P=0,004, F=0,509, df=10, n=6), PVR (P=0,001, F=3,66, df=10, n=6) y PVRI (P=0,001, F=2,656, df=10, n=6 ) y menor volumen sistólico (SV) (P=0,001, F=2,932, df=10, n=6), GC (P=0,001, F=0,097, df=10, n=6) e IC (P= 0.001, F = 6.585, df = 10, n = 6) se observaron en el grupo MCT que en el grupo vehículo (Fig. 3F).Estos resultados sugieren que el modelo porcino de PAH inducido por MCT se estableció con éxito y podría usarse para evaluar el efecto terapéutico de la ENG.

Establecimiento de un modelo de PAH porcino.Una tinción elástica EVG de los pulmones muestra los cambios patológicos en lechones con HAP inducida por MCT y el grupo tratado con vehículo.Las flechas indican engrosamiento desigual de la capa media de las arterias pulmonares, con estenosis de la luz, arteriolas pulmonares muscularizadas y engrosamiento intersticial pulmonar con infiltración de células inflamatorias.B Tinción de inmunofluorescencia de Ki67 y α-SMA en secciones incluidas en parafina de tejido pulmonar de lechones con HAP inducida por MCT o del grupo tratado con vehículo.Barras de escala, 50 μm.Tinción C H&E y tinción de Masson del miocardio ventricular derecho de lechones con HAP inducida por MCT o del grupo tratado con vehículo.Barras de escala, 50 μm para tinción H&E y 100 μm para tinción de Masson.Tinción D EVG de la túnica media de la arteria pulmonar principal de lechones con HAP inducida por MCT o del grupo tratado con vehículo.Barras de escala, 2 mm.E Imágenes representativas y cuantificación de la expresión de eNOS en los tejidos pulmonares de lechones con HAP inducida por MCT o del grupo tratado con vehículo mediante transferencia Western.F Los datos hemodinámicos de la circulación pulmonar, incluidos sPAP, dPAP, mPAP, SV, CO, CI, PVR y PVRI, se midieron y calcularon mediante la intervención del catéter en lechones con HAP inducida por MCT o en el grupo tratado con vehículo.* P<0,05, ** P<0,01, *** P<0,001;en comparación con el grupo de vehículos, según lo analizado por la prueba t de Student

Mediante el uso de un modelo porcino de PAH, exploramos más a fondo si el ENG podría reducir la PAP.Conectamos el ENG a un ventilador y registramos los cambios en la PAP con un catéter Swan-Ganz antes y después de la inhalación de NO (Fig. 4A).En el grupo PAH+NO, los animales inhalaron NO a 20 ppm durante 4 h como dosis inicial, y la concentración de NO disminuyó a razón de 10 ppm por hora en las siguientes 2 h.Después de la inhalación de NO, la expresión de guanilato ciclasa soluble (sGC) (P<0.05, n=3) y PKG (P<0.05, n=3) aumentó significativamente, lo que indica que el NO inhalado activó la vía de señalización mediada por cGMP (Fig. .4B).Como era de esperar, el análisis de gases en sangre arterial mostró que el enriquecimiento de PaO2 aumentó significativamente en comparación con 0,5 h (P <0,001), 2 h (P <0,001) y 6 h (P <0,01) después de la inhalación de NO (Fig. 4C y archivo adicional 1: Tabla S9).En comparación con el grupo PAH, el grupo PAH+NO mostró niveles significativamente más bajos de sPAP (P = 0,045 a las 0,5 h, P = 0,032 a las 2 h), dPAP (P = 0,05 a las 0,5 h, P = 0,030 a las 2 h) y mPAP ( P = 0,036 a las 0,5 h, P = 0,006 a las 2 h) después de la inhalación (Fig. 4D), acompañado de mejoras consistentes en SV (P = 0,007 a las 0,5 h, P = 0,003 a las 2 h), CO (P = 0,005 a 0,5h, P=0,013 a las 2h) y CI (P=0,026 a las 0,5h, P=0,014 a las 2h) (Fig. 4E).Además, la PVR calculada (P = 0,001 a las 0,5 h, P = 0,001 a las 2 h) y la PVRI (P = 0,007 a las 0,5 h, P = 0,001 a las 2 h) se aliviaron al mismo tiempo en el grupo PAH+NO ( figura 4F).

El ENG alivió eficazmente la hipoxemia y mejoró la hemodinámica pulmonar en el modelo de HAP porcina.AA esquema de la conexión del ENG al ventilador y la adquisición de datos hemodinámicos.B Transferencia Western para sGC y PKG en los tejidos pulmonares de lechones con HAP en presencia o ausencia de inhalación de NO (n=6/grupo).C Detección de PaO2 en lechones con PAH en presencia o ausencia de inhalación de NO o el grupo simulado en el momento indicado (n=6/grupo).D–F La medición de PAP (D);SV, CO y CI (E);y PVR y PVRI (F).* P<0,05, ** P<0,01;en comparación con el grupo PAH, según lo analizado por la prueba t de Student (B) o ANOVA de dos vías con medidas repetidas (C–F)

Los análisis de sangre, la bioquímica sérica y los exámenes de coagulación no revelaron diferencias significativas (P>0,05) antes y después de la aplicación de la ENG (Fig. 5A–C, Archivo adicional 1: Tabla S10), lo que sugiere una hepatotoxicidad y una toxicidad hematológica mínimas.Después del tratamiento con ENG, la metahemoglobina en el grupo PAH+NO se mantuvo en un nivel normal y no aumentó significativamente en comparación con la del grupo PAH (P>0,05) (Fig. 5D), lo que indica que la concentración terapéutica de NO producida por el ENG no causó metahemoglobinemia.En patología, el ENG no causó lesiones significativas en los bronquiolos pulmonares y bronquios terminales en lechones con HAP (Fig. 5E).

Examen de indicadores fisiológicos y patología pulmonar tras la inhalación de NO con el ENG.A–D Comparación de células sanguíneas (A);función hepática y renal (B);función procoagulante (C);y metahemoglobina (D) entre lechones con HAP tratados con ENG y no tratados con ENG;en comparación con el grupo HAP, analizado mediante la prueba t de Student.Tinción E H&E de secciones de parafina de bronquiolos (barras de escala, 500 μm) y bronquios terminales (barras de escala, 50 μm)

Colectivamente, confirmamos en un modelo de HAP porcina que el ENG puede aliviar eficazmente el compromiso hemodinámico y mejorar las funciones cardíacas a un nivel terapéutico de NO administrado sin causar alteraciones hematológicas, hepáticas ni lesiones pulmonares.

Actualmente, existen múltiples diseños de generadores de NO para la terapia de inhalación, pero ninguno está disponible para uso doméstico en el tratamiento de la HAP [14].Aquí, diseñamos un modelo novedoso de un generador de NO que deriva NO gaseoso de una solución de nitrito a través de un método electroquímico y verificamos su eficacia y seguridad en un modelo preclínico.El ENG entregó NO en un rango terapéutico de 0-100 ppm en 5 min con niveles de NO2 insignificantes (<1 ppm), cumpliendo con los requisitos de calidad y seguridad establecidos por el Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional [23].El módulo electrolítico clave en el ENG podría mantener una producción constante de NO a 20 ppm durante al menos 7 días, y el módulo podría reemplazarse fácilmente a bajo costo.En lechones con PAH inducida por MCT, nuestro dispositivo mejoró de manera efectiva la hemodinámica y las funciones cardíacas sin causar alteraciones fisiológicas importantes.

Los medicamentos actuales utilizados para el tratamiento de la HAP, ya sea que se administren por vía intravenosa, subcutánea u oral, se asocian con hipotensión sistémica dependiente de la dosis en diversos grados.Cabe señalar que este efecto adverso está ausente con los medicamentos inhalados, incluidos iloprost y NO.El iloprost generalmente se administra cada 2-8 h con efectos terapéuticos intermitentes, mientras que el NO puede inhalarse durante un tiempo relativamente largo y mantiene los efectos terapéuticos estables.Para el uso en el hogar de la terapia de inhalación de NO, la inhalación continua de dosis bajas durante el sueño podría ser una opción factible sin interferir con los pacientes en reposo.Para cumplir con este objetivo, se necesita con urgencia un generador de NO confiable diseñado para aplicaciones en el hogar.

Nuestro dispositivo incorporó varias innovaciones técnicas importantes para lograr este objetivo.En primer lugar, el ENG utiliza N2 como gas de barrido para eliminar la reacción entre el O2 y el NO recién formado, así como para evitar que el catalizador del ligando de cobre (II) se oxide en la solución cerca de los electrodos.Como resultado, la eficiencia de la generación de NO aumentó con un mayor flujo de barrido de N2.En el tanque de almacenamiento, el NO y el N2 generados se presurizan para minimizar la desproporción de NO y también permitieron una salida estable y ajustable de NO altamente purificado bajo diferentes velocidades de flujo del ventilador.Actualmente ajustamos el caudal entre 0,3 y 0,5 l/min, que es suficiente para satisfacer las demandas de la mayoría de los entornos clínicos.En segundo lugar, se utilizó una combinación de un electrodo inerte (Au) y una solución de electrolito que contenía Cu para la generación de NO.Al aplicar corriente de 0 a 90 mA, este método permitió la producción de NO en concentraciones que oscilaron entre 0 y 3600 ppm en la fase de solución sin producir subproductos tóxicos como N2O, lo que mejoró enormemente la seguridad de la aplicación clínica.En tercer lugar, se integró una membrana de fibra hueca de silicona en el dispositivo de intercambio de gases, que elimina eficazmente el NO residual de la solución electrolítica.Esta modificación mejoró la estabilidad de la parte consumible y prolongó su vida útil para lograr el nivel deseado de NO, reduciendo significativamente el costo financiero del ENG.

Los cilindros de gas de NO a alta presión convencionales están limitados por su alto costo, volumen y desproporción de NO después del almacenamiento durante largos períodos de tiempo.Para superar estos problemas, se han propuesto muchas soluciones alternativas, que incluyen cilindros de NO en miniatura como INOpulse, producción eléctrica de NO con descarga de chispa y la derivación de NO a partir de productos químicos como el N2O4 líquido [17, 18].Sin embargo, la aplicación en el hogar de cilindros de NO en miniatura tiene una tasa de aceptación baja en entornos clínicos debido a su engorroso procedimiento de instalación y al reemplazo frecuente de los cilindros de gas debido a la limitada capacidad de almacenamiento de NO.El dispositivo eléctrico de generación de NO tiene dificultades para mantener una producción estable de NO debido a la fluctuación de los flujos de aire a través del chispero, y este dispositivo tiene un riesgo relativamente mayor de generar productos tóxicos, como partículas de metal, latón u O3.Estos problemas de seguridad y rendimiento restringen la utilidad de estos dispositivos para la terapia en el hogar.La generación química de NO a partir de N2O4 líquido va acompañada de la producción de óxido de nitrógeno y partículas tóxicas que causan problemas de salud y, por lo tanto, pueden no ser una opción adecuada para la terapia en el hogar.En este estudio, el gas NO liberado de nuestro modelo ENG contenía muy pocos subproductos tóxicos, y la administración de NO usando el ENG no causó metahemoglobinemia y tuvo una hepatotoxicidad y una toxicidad hematológica mínimas en lechones con HAP experimental.En este sentido, nuestro novedoso dispositivo ENG destaca por su capacidad para generar NO de forma segura con una toxicidad mínima y un bajo coste de consumibles, lo que lo hace adecuado para el manejo domiciliario de pacientes con HAP.

Debido a la falta de dispositivos de administración de NO sostenibles y económicos en el hogar, la terapia de inhalación de NO se ha restringido principalmente a entornos hospitalarios y no se considera una opción de tratamiento en el hogar para la PAH y otros escenarios clínicos.Nuestro modelo ENG versátil, portátil y económico no solo es adecuado para la terapia de cabecera para PAH (archivo adicional 1: Figura S2), sino que también tiene el potencial de usarse para pacientes con enfermedades pulmonares crónicas, enfermedades cardíacas congénitas, COVID-19 e incluso en algunas circunstancias de emergencia.Por ejemplo, el ENG podría implementarse para rescatar a viajeros de las tierras altas con edema pulmonar agudo debido a su pequeño tamaño y la rápida producción de la concentración deseada de NO.

Se deben abordar varias limitaciones del ENG antes de su traducción exitosa al uso médico en el hogar.Primero, la falta de una batería ensamblada puede limitar la amplia aplicación del ENG en situaciones de emergencia.En segundo lugar, aunque el aparato es más pequeño y pesa menos que otros productos, no es lo suficientemente móvil para que los pacientes reciban la inhalación deseada de NO en cualquier momento, especialmente para los viajeros de las tierras altas.

Se diseñó y probó un modelo novedoso de un generador de NO, y tiene el potencial de generar NO de alta pureza para una terapia inhalatoria de NO estable, continua y segura para pacientes con PAH.El dispositivo es fácil de usar y puede ser operado por personas sin capacitación especializada, lo que podría mejorar en gran medida su tasa de aceptación en la práctica del mundo real.Nuestro dispositivo puede extender las indicaciones para la terapia de NO inhalado en el hogar a otros escenarios clínicos, como el tratamiento de la EPOC, el edema pulmonar a gran altura y el COVID-19.Teniendo en cuenta su alta rentabilidad, nuestro dispositivo tiene la posibilidad de abordar las necesidades médicas no satisfechas de una gran población de pacientes en países de recursos limitados de todo el mundo.Se necesitan ensayos clínicos para probar la utilidad clínica de este novedoso dispositivo generador de NO.

Los datos que respaldan los hallazgos de este estudio están disponibles del autor correspondiente a pedido razonable.

Monofosfato de guanosina cíclico

Óxido nítrico sintasa endotelial

Administración de Alimentos y Medicamentos

Hipertensión pulmonar persistente en recién nacidos

Enfermedad pulmonar obstructiva crónica

Generador electroquímico de NO

Compuestos orgánicos volátiles

Organización Internacional de Normalización

Índice de resistencia vascular pulmonar

Índice de gasto cardíaco

Abman SH, Hansmann G, Archer SL, Ivy DD, Adatia I, Chung WK, et al.Hipertensión pulmonar pediátrica: directrices de la American Heart Association y la American Thoracic Society.Circulación.2015;132:2037–99.https://doi.org/10.1161/CIR.0000000000000329.

Artículo Google Académico

Barst RJ, McGoon MD, Elliott CG, Foreman AJ, Miller DP, Ivy DD.Supervivencia en la hipertensión arterial pulmonar infantil: conocimientos del registro para evaluar el manejo temprano y a largo plazo de la enfermedad de hipertensión arterial pulmonar.Circulación.2012; 125: 113–22.https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.111.026591.

Artículo Google Académico

Walsh-Sukys MC, Tyson JE, Wright LL, Bauer CR, Korones SB, Stevenson DK, et al.Hipertensión pulmonar persistente del recién nacido en la era anterior al óxido nítrico: variación de la práctica y resultados.Pediatría.2000;105:14–20.https://doi.org/10.1542/peds.105.1.14.

Artículo CAS Google Académico

Ignarro LJ, Ross G, Tillisch J. Farmacología del óxido nítrico derivado del endotelio y los nitrovasodilatadores.Oeste J Med.1991; 154: 51–62.

Frostell CG, Blomqvist H, Hedenstierna G, Lundberg J, Zapol WM.El óxido nítrico inhalado revierte selectivamente la vasoconstricción pulmonar hipóxica humana sin causar vasodilatación sistémica.Anestesiología.1993;78:427–35.https://doi.org/10.1097/00000542-199303000-00005.

Artículo CAS Google Académico

Clark RH, Kueser TJ, Walker MW, Southgate WM, Huckaby JL, Pérez JA, et al.Tratamiento con dosis bajas de óxido nítrico para la hipertensión pulmonar persistente del recién nacido.N Engl J Med.2000;342:469–74.https://doi.org/10.1056/NEJM200002173420704.

Artículo CAS Google Académico

Fox-Robichaud A, Payne D, Hasan SU, Ostrovsky L, Fairhead T, Reinhardt P, et al.El NO inhalado como terapia antiadhesiva viable para la lesión por isquemia/reperfusión de lechos microvasculares distales.J Clin Invest.1998;101:2497–505.https://doi.org/10.1172/JCI2736.

Artículo CAS Google Académico

Fecha H, Triantafillou AN, Trulock EP, Pohl MS, Cooper JD, Patterson GA.El óxido nítrico inhalado reduce la disfunción del aloinjerto de pulmón humano.J Thorac Cardiovasc Surg.1996; 111:913–9.https://doi.org/10.1016/s0022-5223(96)70364-1.

Artículo CAS Google Académico

Vonbank K, Ziesche R, Higenbottam TW, Stiebellehner L, Petkov V, Schenk P, et al.Ensayo aleatorizado prospectivo controlado sobre los efectos en la hemodinámica pulmonar del uso ambulatorio a largo plazo de óxido nítrico y oxígeno en pacientes con EPOC grave.Tórax.2003;58:289–93.https://doi.org/10.1136/tórax.58.4.289.

Artículo CAS Google Académico

Kavarana MN, Pessin-Minsley MS, Urtecho J, Catanese KA, Flannery M, Oz MC, et al.Disfunción del ventrículo derecho y falla orgánica en receptores de dispositivos de asistencia del ventrículo izquierdo: un problema continuo.Ann Thorac Surg.2002;73:745–50.https://doi.org/10.1016/s0003-4975(01)03406-3.

Artículo Google Académico

Kato GJ, Steinberg MH, Gladwin MT.La hemólisis intravascular y la fisiopatología de la enfermedad de células falciformes.J Clin Invest.2017;127:750–60.https://doi.org/10.1172/JCI89741.

Artículo Google Académico

Jr Roberts JD, Lang P, Bigatello LM, Vlahakes GJ, Zapol WM.Óxido nítrico inhalado en cardiopatías congénitas.Circulación.1993;87:447–53.https://doi.org/10.1161/01.cir.87.2.447.

Artículo Google Académico

Lisi F, Zelikin AN, Chandrawati R. Óxido nítrico para combatir infecciones virales.Ciencia avanzada (Weinh).2021;8:2003895.https://doi.org/10.1002/advs.202003895.

Artículo CAS Google Académico

Todd Tzanetos DR, Housley JJ, Barr FE, May WL, Landers CD.La implementación de un protocolo de óxido nítrico inhalado disminuye el costo directo asociado con su uso.Cuidado de la respiración.2015;60:644–50.https://doi.org/10.4187/respcare.03308.

Artículo Google Académico

Gianni S, Carroll RW, Kacmarek RM, Berra L. Sistemas de administración de óxido nítrico inhalado para pacientes con ventilación mecánica y no intubados: una revisión.Cuidado de la respiración.2021;66:1021–8.https://doi.org/10.4187/respcare.08856.

Artículo Google Académico

Nathan SD, Flaherty KR, Glassberg MK, Raghu G, Swigris J, Alvarez R, et al.Óxido nítrico inhalado en sujetos con riesgo de hipertensión pulmonar asociada a fibrosis pulmonar.Tórax.2020;158:637–45.https://doi.org/10.1016/j.chest.2020.02.016.

Artículo CAS Google Académico

Yu B, Muenster S, Blaesi AH, Bloch DB, Zapol WM.Producción de óxido nítrico por descarga eléctrica pulsada en el aire para terapia de inhalación portátil.Sci Transl Med.2015;7:294ra107.https://doi.org/10.1126/scitranslmed.aaa3097.

Artículo CAS Google Académico

Centro de Evaluación e Investigación de Medicamentos.Número de solicitud: 202860Orig1s000.https://www.accessdata.fda.gov/drugsatfda_docs/nda/2019/202860Orig1s000Approv.pdf.Consultado el 20 de septiembre de 2022.

Las pautas ARRIVE 2.0: lista de verificación del autor.https://arriveguidelines.org/resources/author-checklists.Consultado el 4 de noviembre de 2022.

Evaluación de la biocompatibilidad de las vías de los gases respirables en aplicaciones sanitarias. Parte 3: Pruebas de emisiones de compuestos orgánicos volátiles (COV) (ISO 18562-3:2017).https://www.iso.org/standard/62894.html.Consultado el 20 de septiembre de 2022.

Evaluación de la biocompatibilidad de las vías del gas respirable en aplicaciones sanitarias — Parte 1: Evaluación y prueba dentro de un proceso de gestión de riesgos (ISO 18562-1:2017).https://www.iso.org/standard/62892.html.Consultado el 20 de septiembre de 2022.

Evaluación de la biocompatibilidad de las vías de los gases respirables en aplicaciones sanitarias. Parte 2: Ensayos de emisiones de partículas (ISO 18562-2:2017).https://www.iso.org/standard/62893.html.Consultado el 20 de septiembre de 2022.

El Instituto Nacional de Seguridad y Salud Ocupacional (NIOSH).DIOXIDO DE NITROGENO.https://www.cdc.gov/niosh/pel88/10102-44.html.Consultado el 20 de septiembre de 2022.

Agradecemos enormemente la ayuda en los estudios con animales del Dr. Bin Gong del Hospital Drum Tower de Nanjing.

Este trabajo cuenta con el apoyo de la Fundación Nacional de Ciencias Naturales de China (U20A2018), el Programa de líder académico médico destacado de Shanghái (2019LJ22), el Programa de navegación de Shanghái (20YF1428700), el Programa Chenguang de Shanghái (20CG23), el Programa Pujiang de Shanghái (22PJ1410100) y un equipo de investigación innovador. de universidades locales de alto nivel en Shanghai

Yiwei Liu, Yifan Zhu y Chenyu Jiang contribuyen por igual.

Centro del Corazón e Instituto de Cardiopatías Congénitas Pediátricas de Shanghái, Centro Médico Infantil de Shanghái, Facultad de Medicina, Universidad Jiao Tong de Shanghái, Shanghái, 200127, China

Yiwei Liu, Yifan Zhu, Chenyu Jiang, Yi Yan, Bei Feng, Zhuoming Xu y Hao Zhang

Centro de Investigación Clínica de Shanghái para Enfermedades Pediátricas Raras, Centro Médico Infantil de Shanghái, Facultad de Medicina, Universidad Jiao Tong de Shanghái, Shanghái, 200127, China

Yiwei Liu, Yifan Zhu, Chenyu Jiang y Hao Zhang

State Key Laboratory of Cardiovascular Disease, Fuwai Hospital, National Center for Cardiovascular Diseases, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing, 100037, China

Zhanhao Su, Xiaojian Wang y Hao Zhang

Instituto para la Prevención Cardiovascular (IPEK), Universidad Ludwig Maximilian de Múnich, 80539, Múnich, Alemania

DZHK (Centro Alemán para la Investigación Cardiovascular), sitio asociado Munich Heart Alliance, 80539, Munich, Alemania

Nanjing Novlead Biotechnology Corporation Limited, Nanjing, 211800, China

Wen Mao y Yuyan Zhang

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Conceptualización y metodología: YL, YZ1, CJ y HZ.Adquisición de datos: YL, YZ1 y CJ.Análisis e interpretación de los datos.YL, YZ1 y CJ.Redacción del manuscrito: YL e YZ1.Administración de proyectos y software: WM, YZ2 y HZ.Visualización: ZS.Revisión y edición: YY, BF, XW y ZX.Aprobación final y adquisición de fondos: YL, YY y HZ.Todos los autores leyeron y aprobaron el manuscrito final.

El estudio con animales fue aprobado por el Comité de Ética Animal del Centro Médico Infantil de Shanghái.Todos los procedimientos y el cuidado de los animales se realizaron con protocolos animales aprobados de acuerdo con las pautas del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales (IACUC).

Los autores declaran que no tienen intereses contrapuestos.

Springer Nature se mantiene neutral con respecto a los reclamos jurisdiccionales en mapas publicados y afiliaciones institucionales.

Composición del gas producido a partir de ENG.Tabla S2.Basado en el volumen respiratorio diario de adultos, cantidad calculada de VOC descargado que se puede inhalar dentro de diferentes 24 horas.Tabla S3.Basado en el volumen respiratorio diario de los niños, cantidad calculada de VOC descargado que se puede inhalar dentro de diferentes 24 horas.Tabla S4.Basado en el volumen respiratorio diario de los bebés, cantidad calculada de VOC descargado que se puede inhalar dentro de diferentes 24 horas. Tabla S5.Con base en el volumen respiratorio diario del recién nacido, cantidad calculada de VOC descargado que se puede inhalar dentro de diferentes 24 horas. Tabla S6.Cantidad total de material particulado emitido por la salida de gas ENG en 24 horas.Tabla S7.Rutina de sangre preoperatoria, bioquímica sanguínea y coagulación en grupo vehículo y grupo MCT.Tabla S8.Análisis preoperatorio de gases en sangre arterial en el grupo vehículo y el grupo MCT. Tabla S9.Análisis de gases en sangre arterial a las 6 horas de la inhalación de NO en el grupo PAH y en el grupo PAH+NO.Tabla S10.Rutina postoperatoria de sangre, bioquímica sanguínea y coagulación en grupo PAH y grupo PAH+NO.Figura S1.Niveles de NO2 bajo un rango más amplio de dosis de NO (20-80ppm).Figura S2.Imagen del mundo real del ENG trabajando con una máscara de presión positiva continua en las vías respiratorias (CPAP) para inhalación junto a la cama.

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Liu, Y., Zhu, Y., Jiang, C. et al.Un generador de óxido nítrico electroquímico para la terapia de inhalación en el hogar en la hipertensión arterial pulmonar.BMC Med 20, 481 (2022).https://doi.org/10.1186/s12916-022-02686-6

DOI: https://doi.org/10.1186/s12916-022-02686-6

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